扶正化瘀方对肝星状细胞胶原生成的抑制作用

刘成海 刘成 刘平 徐列明 顾宏图

    观察扶正化瘀方药物血清体外给药对正常大鼠肝星状细胞,及该方体内给药对二甲基亚硝胺纤维肝星状细胞胶原生成与表达的影响。

    一、材料与方法

    Wistar雄性大鼠。扶正化瘀方制成每克含生药2.703克的流浸膏。正常大鼠以0.46g/kg体重剂量扶正化瘀方浸膏稀释液灌胃,第一次给药2小时后相同剂量重复给药一次,再l小时后,后腔静脉采血,离心、灭活以制备药物血清。二甲基亚硝胺腹腔注射制备肝纤维化大鼠模型,扶正化瘀方同上剂量治疗7天。按本所常规方法分离纤维肝及正常肝大鼠星状细胞,正常星状细胞传一代培养,药物血清温育72小时,纤维肝星状细胞原代培养48小时。脯氨酸掺入、胶原酶消化法测定细胞内、外胶原生成率。细胞免疫化学PAP法染色I、Ⅲ、Ⅳ型胶原。统计方法采用t检验。

    二、结果

    药物血清体外给药对正常星状细胞形态无明显影响,但对细胞内、外的胶原生成率明显抑制(表1)。胶原染色半定量结果:对照组I、Ⅲ、Ⅳ型胶原阳性细胞分别为10.00±1.17, 8.90±0.38,9.40±0.08,药物血清对各型胶原均有抑制,抑制率(%)分别为45.67士11.24, 22.11±3.24,32.98±7.36。药物体内给药对纤维肝星状细胞内、外胶原生成率也有抑制作用(表2)。

    讨论

    星状细胞胶原生成有细胞内合成及细胞外分泌两个过程,其活化后大量增殖及生成胶原等细胞外基质是肝纤维化的细胞学基础。我们发现不同温育浓度的扶正化瘀方药物血清对细胞内、外的胶原生成率均有抑制作用,呈一定浓度依赖性,而以细胞内抑制程度为甚。体内给药后,纤维肝贮脂细胞的胶原生成率明显减少,抑制程度也为细胞内高于细胞外,表明该方对星状细胞的胶原合成与分泌均有抑制作用。肝纤维化胶原增生程度为Ⅰ﹥Ⅲ﹥Ⅳ型。实验中对照组I型胶原表达最多,反映了星状细胞活化后胶原生成分布的改变。用药后各型胶原均减少,而尤以Ⅰ型为甚,进一步表明该方对星状细胞的活化及其胶原生成的抑制作用,这可能是该方抗肝纤维化的主要机制之一。

表

本课题受国家自然科学基金资助(No:3 9570889)
作者单位:200032 上海中医药大学肝病研究所

[引自中华肝病杂志,1998(1)]